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玉米赤霉烯酮样本前处置及测定体例

文章种别:常识百科| 宣布日期:2013.10.22

玉米赤霉烯酮样本处置前须知:

处置任何样本时,都须注重:

(1)尝试中必须利用一次性吸头,在吸收差别的试剂时要改换吸头。

(2)尝试之前须查抄各类尝试用具是不是清洁,必须利用干净尝试用具,以防止净化搅扰尝试成果。

玉米赤霉烯酮样本前处置及测定体例

样本前处置步骤:

饲料处置体例:

1、取5g 破坏样品,插手50 mL 样品提取液;

2、猛烈振荡10 min;

3、4000 r/min 离心5 min,或用通俗滤纸过滤;

4、将上清液或滤液用样品浓缩液按1:19 体积比停止浓缩并充实混匀(1 份上清液或滤液+19 份样品浓缩液);

5、取浓缩后液体待测。

测定步骤:

1、将所需试剂和微孔板从冷藏情况中掏出,在室温下均衡30 min,每种液体利用前均须摇匀。注重规范液均需做2 个平行实验。

2、加规范品:插手规范品/样品50 μL/孔,再加酶标记物50 μL/孔,最初插手抗体任务液μL/孔,悄悄振荡混匀,用盖板膜盖好,室温25 ℃下避光反映30 min。

3、洗板:谨慎揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加洗濯液300 μL/孔,每次浸泡15~30 s,充实洗濯4~5 次,用吸水纸拍干。

4、显色:每孔先各插手底物液A 50 μL,再各插手底物液B 50 μL,悄悄振荡混匀,用盖板膜盖好,室温25 ℃下避光反映15 min。

5、测定:每孔各加50 μL 停止液,设定酶标仪在450 nm 处,测定OD 值(倡议用450/630 nm 双波长检测,在5 min 内读完数据)。




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